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CP: Chemische Physik

CP 4: Biologische Systeme

CP 4.6: Poster

Monday, March 9, 1998, 18:00–20:00, P1

Abbildung von Protein/Nucleinsäure-Komplexen mittels AFM — •K. Ewert¹, M. Bonin², J. Oberstrass², W. Nellen², E. Oesterschulze¹ und R. Kassing¹ — ¹Institut für Technische Physik, Universität Kassel, Heinrich-Plett-Straße 40, D-34132 Kassel — ²Abt. Genetik, Universität Kassel, Heinrich-Plett-Straße 40, D-34132 Kassel

Unser Ziel ist, Sekundärstrukturen und Wechselwirkungen von Nukleinsäure-Protein Komplexen und Sense/Antisense-RNA Komplexen aufzuklären. Dabei erwarten wir von einer Verknüpfung von weiterentwickelten SXM-Techniken und biochemischen, sowie molekularbiologischen Charakterisierungsmethoden einen tieferen Einblick in Sekundärstrukturen und Wechselwirkungen von Biomolekülen. Definiert geschnittene DNA Moleküle wurden mit T7 Polymerase, für die nur eine Bindungsstelle auf der DNA vorhanden war, dekoriert. Auf diese Weise konnten sowohl die Länge des Gesamtmoleküls als auch der korrekte Bindungsort in den AFM-Bildern überprüft werden. Desweiteren wurden komplementäre RNA Moleküle mit einer Länge von 260 nts (ca. 90 nm) hergestellt und diese zu einem Doppelstrang hybridisiert. Zum Nachweis der dsRNA und gleichzeitig als erster Ansatz zur Untersuchung von RNA-Protein Wechselwirkung wurden monoklonale Antikörper (J2) eingesetzt. Wir fanden ein bis zwei gebundene Antikörper je dsRNA Molekül. Alle Moleküle wurden auf Glimmer an Luft im Tapping-Modus gescannt.