Bonn 2000 – wissenschaftliches Programm
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Q: Quantenoptik
Q 18: Laser in der Medizin I
Q 18.5: Vortrag
Mittwoch, 5. April 2000, 10:00–10:15, HS XII
Fluoreszenz–Fotometer für in–vitro–Fotometrie an Zellen — •E. Klopp1, J. Struckmeier1, M. Hofmann1, T. Pohl2, M. Kratz2 und D. Jones2 — 1Fachbereich Physik und Wissenschaftliches Zentrum für Materialwissenschaften, Philipps-Universität Marburg — 2Institut für Experimentelle Orthopädie, Philipps-Universität Marburg
Wir stellen ein flexibel einsetzbares und kostengünstiges Fluoreszenz-Fotometer vor, das u.a. in–vitro–Messungen intrazellulärer Kalziumkonzentrationen ermöglicht.
Die fotometrischen Messungen erfolgen mit dem in die Zelle eingebrachten Farbstoff INDO–1. Nach Anregung bei 350nm nimmt dessen Emissionsbande bei 405nm gegenüber der bei 490nm mit steigender Kalziumkonzentration zu. Das Verhältnis der beiden Fluoreszenzintensitäten ist somit ein direktes Maß für die Kalziumkonzentration. Da konventionelle Lichtquellen in diesem Wellenlängenbereich aufwendig und teuer sind, verwenden wir eine frequenzverdoppelte Laserdiode mit einer Emissionswellenlänge von 690nm. Die Detektion der Emissionsbanden erfolgt durch Photonenzählen mit Photomultipliern, so dass eine größtmögliche Detektionsempfindlichkeit erreicht wird.
Kalibrierungsmessungen haben gezeigt, daß Konzentrationsänderungen bis in den sub–nanomolaren Bereich detektiert werden können. Erste Messungen auf Parabelflügen lieferten Kalziumantworten von Osteoblasten auf Schwerelosigkeit.